高架十字迷宮與焦慮行為的關系

探討慢性精神應激對血管平滑肌細胞的影響及與焦慮行為的關系。

方法　將38只SD大鼠按照隨機數字表隨機分為精神應激組( 30只)和對照組( 8只) 。對應激組采用限制應激和飲水沖突應激,持續2個月;分別于應激前、應激后1, 2個月用空場實驗和高架十字迷宮實驗觀察大鼠焦慮水平,計算出中央格爬行次數、外周格爬行次數、開放臂進入次數及停留時間、閉合臂進入次數及停留時間。以**組化方法測定主動脈血管局部增殖細胞核抗原( PCNA)表達,并用蘇木素-伊紅染色法觀察主動脈結構變化。

結果　(1)與對照組比較,應激1個月后,應激組大鼠在開放臂的次數和時間、閉合臂的次數少( P < 0105) ,閉合臂的時間多(均P < 0101) ;應激2個月后,應激組大鼠在外周格爬行的個數和閉合臂時間多( P < 0101) ,開放臂時間少( P < 0101) 。(2)應激組大鼠主動脈失去原有的正常結構,中層血管平滑肌細胞排列紊亂,數目增多。(3)應激組大鼠血管壁PCNA表達的陽性細胞數為( 16 485 ±10 694)個/mm2 ,對照組大鼠為( 4 012 ±2 256)個/mm2 , t = 41359, P <0101。(4)中度焦慮組大鼠PCNA表達與大鼠焦慮呈正相關( Pearson相關系數為01718, P = 01004) 。

結論　大鼠中度焦慮時,其血管平滑肌細胞增殖率與焦慮情緒呈正相關。

實驗方法

精神應激方法:為隨機給予飲水沖突應激和限制應激兩種應激方式。飲水沖突應激是根據Vogel等沖突模型和Geller等[ 9 ]沖突模型設計而成。操作箱為標準大鼠飼養籠,將電腦時控儀和實驗組的飼養籠聯結成電流環路,電壓36 V,隨機設定電腦時控儀的程序。當大鼠飲水時因電路接通而會受到電擊;不飲水則電路不通,不會有電擊,由此造成飲水沖突應激。通過電腦時控儀任意設定電擊時間,每天的通電時間不同(如周一上午8: 00—9: 00為通電時間,間隔40 min,再設定9: 40—11: 00為通電時間,再間隔30 min,如此循環) ,總的通電時間不超過20 h;因此大鼠無法預測何時會有電擊。限制應激是將大鼠限制在一狹小的容器中(自制一塑料瓶,直徑7 cm,長25 cm,一端敞小口,一端為活動式的大口) ,在此容器中,大鼠可以翻滾身體,但不能前后左右運動。在飲水沖突應激的前提下,再加上限制應激每周隨機進行2次,每次持續時間不等。兩種應激共持續60 d。

動物行為學評定:分別于應激前、應激后1個月、2個月時進行評定。(1)開場試驗 ,用一

100 cm ×100 cm ×100 cm木制箱,底板有25個20cm ×20 cm的方格,沿墻沿稱外周格,其余為中央格。將大鼠放在正中央格,觀察其在中央格和外周格爬行次數,共5 min。以大鼠的三爪以上跨入鄰格計數。計算爬行的總格數、中央格爬行次數占爬行總格數的比例。因中央格爬行次數與大鼠的焦慮行為呈反比,中央格爬行次數少,表明大鼠很焦慮。

(2)高架十字迷宮實驗 ,實驗裝置由兩條相對開臂(50 cm ×10 cm ×10 cm)和兩條相對閉臂(50 cm ×10 cm ×10 cm)及中央區(10 cm ×10 cm)連接而成,距離地面50 cm。空場實驗結束后將大鼠從中央區面向閉臂放入,分別觀察其在開放臂和閉合臂的進入次數及停留時間,共5 min。因開放臂進入次數及停留時間與大鼠的焦慮情緒呈負相關,進入開放臂次數越少,停留時間越短,說明大鼠的焦慮情緒越嚴重。

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