在神經科學和行為學的研究領域，小鼠懸尾實驗（Tail Suspension Test, TST）作為一種經典的行為學測試方法，被廣泛用于評估抗抑郁藥效的療效及探究抑郁樣行為的機制。

實驗準備階段

環境設置：實驗的首要條件是營造一個穩定且適宜的動物生活環境。SPF級（無特定病原體）動物房是Zui佳選擇，室溫需嚴格控制在22±2℃，濕度保持在40±20%，模擬小鼠的棲息環境。此外12小時的晝夜交替周期有助于維持小鼠的正常生理節律。實驗室應保持安靜，遠離噪音源，以減少外界因素對實驗結果的影響。

設備與材料準備：

1. 實驗箱的設計，采用55cm高、60cm寬、11.5cm深的塑料箱，內部設置擋板以分隔個體，減少相互干擾。

2. 核心設備包括懸尾裝置，由懸掛桿和固定膠帶組成，用于懸掛小鼠；

3. 醫用膠帶需選擇對皮膚溫和、不易引起過敏的類型；

4. 高清攝像設備確保全程記錄小鼠行為細節；

5. 分析軟件如VisuTrack，能夠自動追蹤并分析視頻數據，提高實驗效率和準確性；

6. 準備充足的清潔用品，確保實驗后設備的徹底消殺。

動物準備：實驗對象選用SPF級小鼠，健康無病疾，且已適應實驗環境至少24小時，理想適應期為三天。在此期間，小鼠應自由攝食飲水，保持正常的晝夜活動模式，以減少因環境適應不適引起的行為偏差。

實驗操作步驟：

動物處理：實驗開始時，以溫和的方式從籠中取出小鼠，避免任何可能增加其壓力的操作。使用醫用膠帶在距離尾巴尖約1cm處輕輕固定，確保既不影響小鼠呼吸，也不造成疼痛。

實驗設置：將小鼠尾巴懸掛在裝置上，調整至鼻尖距離地面約30cm的高度，旨在模擬一種無法逃脫的困境。攝像設備需預先調整，確保小鼠全身清晰可見，背景顏色與小鼠形成鮮明對比，便于后續分析。

行為記錄：錄像開始，持續6分鐘，但重點分析后4分鐘的不動時間，因為這段時間Zui能反映小鼠的絕望情緒。記錄小鼠的掙扎行為，包括嘗試逃脫、四肢擺動等，以及Zui終進入的不動狀態，這些都是評估抑郁樣行為的關鍵指標。

實驗結束處理：6分鐘后，輕柔地移除膠帶，避免對小鼠造成傷害，并迅速將其放回原籠。隨后，徹底清理實驗區域，收集所有排泄物，使用專用的清潔劑和消殺劑對實驗設備進行徹底清潔，確保下次實驗的衛生條件。

數據分析：

行為分析：利用VisuTrack等分析軟件，計算每只小鼠的不動時間和掙扎行為的持續時間。通過計算平均不動時間，并與對照組進行比較，可以評估實驗組小鼠是否表現出更多的抑郁樣行為。

統計處理：采用T檢驗來分析實驗組與對照組之間的差異，根據實驗設計選擇適合的配對或未配對T檢驗。統計顯著性設定為P<0.05，意味著兩組之間的差異具有統計學上的意義。

實驗注意事項

1. 品種差異
   不同品種的小鼠可能對懸尾實驗的反應不同，因此需設立相應的對照組，以準確評估實驗效果。
2. 重復實驗
   為減少個體差異對結果的影響，通常避免在同一小鼠上重復實驗。若必須重復，應至少間隔半個月，以減少前次實驗可能產生的長期影響。
3. 動物福利
   實驗過程中，必須嚴格遵守動物福利原則，確保所有操作盡可能減少小鼠的應激反應。
4. 自發活動監測
   實驗前后監測小鼠的自發活動，有助于排除因運動能力差異對實驗結果造成的干擾。
5. 清潔消殺
   每次實驗后，對實驗設備和環境的徹底清潔消殺，是確保實驗衛生條件、避免交叉污染的關鍵步驟。
6. 防止抱尾
7. 在實驗過程中小鼠易在懸吊狀態下反向攀爬，抱住自己的尾巴不動，特別是C57小鼠。為了避免這一情況的發生，可采用軟塑管套在小鼠尾巴上，特點是重量輕、表面光滑，小鼠無法抓住。