介紹
習(xí)得性無助范式是一種廣泛使用的抑郁動(dòng)物模型，*初由 Overmier 和 Seligman (1967) 描述，他們觀察到當(dāng)面對厭惡但可以逃避時(shí)，暴露于不可避免的沖擊會(huì)導(dǎo)致情緒表達(dá)、聯(lián)想學(xué)習(xí)和行為應(yīng)對方面的顯著缺陷刺激。該模型已針對小鼠和大鼠進(jìn)行了優(yōu)化，并且僅在某些動(dòng)物中引發(fā)無助行為，以解釋不同受試者對抑郁癥的不同傾向。出現(xiàn)習(xí)得性無助的動(dòng)物表現(xiàn)出與抑郁相關(guān)的癥狀，包括體重和性行為減少、快速眼動(dòng)睡眠改變以及促腎上腺皮質(zhì)**釋放因子和皮質(zhì)酮水平升高。
該模型已通過抗抑郁藥的藥理學(xué)驗(yàn)證，能夠減少逃跑的潛伏期和表現(xiàn)出無助行為的動(dòng)物數(shù)量。這些影響表明，習(xí)得性無助范式作為抗抑郁藥作用的模型提供了預(yù)測有效性。
在調(diào)節(jié)室中對動(dòng)物的尾巴或足部施加隨機(jī)的輕微電擊。地板通常由鋼棒制成以傳導(dǎo)電擊。音調(diào)或信號燈可作為電擊前的無條件刺激。
實(shí)驗(yàn)人員通常會(huì)分析逃避（或終止）失敗的次數(shù)以及逃避或終止試驗(yàn)的潛伏期，這些都是抑郁癥的標(biāo)志。此外，還應(yīng)測量主動(dòng)回避（電擊時(shí)退出或終止）和被動(dòng)回避反應(yīng)。
儀器設(shè)備
執(zhí)行習(xí)得性無助模型所需的設(shè)備主要需要一個(gè)電擊發(fā)生器和一個(gè)帶有鋼棒地板的調(diào)節(jié)室，以進(jìn)行電擊。
調(diào)節(jié)室的尺寸可以根據(jù)動(dòng)物的種類和大小/重量進(jìn)行調(diào)整。對于大鼠，使用內(nèi)部尺寸為 25 X 30 X 21.5 厘米（小）或 48.5 X 30 X 21.5 厘米（大）的調(diào)節(jié)室。對于小鼠，在雙向回避協(xié)議中使用了兩個(gè) 18 X 18 X 30 cm 3隔間。
墻壁可以由鋼制成，以盡量減少避震或有機(jī)玻璃。如果使用鋼，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)考慮使用有機(jī)玻璃制成的一面墻，并在上面覆蓋帶電網(wǎng)格，以方便觀察。
室地板應(yīng)由鋼棒構(gòu)成。對于大鼠，使用 6 毫米直徑和 20 毫米間距， 對小鼠使用 5 毫米直徑和 6 毫米間距。
測試協(xié)議
可靠的沖擊應(yīng)用是必不可少的，并且必須嚴(yán)格控制。習(xí)得性無助是通過對腳部或尾巴施加不可避免的電擊引起的。逃生反應(yīng)應(yīng)該是針對特定物種的，旨在完成中等難度的任務(wù)，以避免在太少或太多動(dòng)物身上引起無助。
該方案包括三個(gè)階段：誘導(dǎo)抑郁樣癥狀、恢復(fù)和測試階段。經(jīng)典地，使用兩個(gè)對照組來研究無法控制的壓力的影響。一個(gè)對照組沒有受到壓力，而另一組則受到無法控制的沖擊。承受無法控制的壓力的動(dòng)物與接受可控電擊的對照組動(dòng)物“套牢”，這意味著相同數(shù)量、持續(xù)時(shí)間和模式的電擊。不可避免的沖擊必須隨機(jī)化，以消除誘導(dǎo)期間的可預(yù)測性并增加產(chǎn)生慢性抑郁樣癥狀的可能性。
不可避免的休克程序
將動(dòng)物轉(zhuǎn)移到調(diào)節(jié)室時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)避免用尾巴撿起動(dòng)物。所有程序在不同的實(shí)驗(yàn)組之間應(yīng)該是一致的。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的光線應(yīng)減至*低。連續(xù)兩天對小鼠進(jìn)行休克程序，每次持續(xù)約 52 分鐘。電擊程序包括連續(xù)兩天的 360 次隨機(jī)電擊（0.150 mA，1-3 秒，間隔 1-15 秒）。
在休克過程中應(yīng)觀察動(dòng)物。由于毛皮、桿之間的糞便以及動(dòng)物與桿接觸的姿勢/特異性引起的阻力——坐在具有相同電位的桿上，將前爪放在未通電的墻壁上或?qū)⒆ψ臃旁跅U之間可能會(huì)影響有效的沖擊應(yīng)用。每次測試結(jié)束后，應(yīng)使用 70% 乙醇清潔腔室，并將動(dòng)物轉(zhuǎn)移回籠子。
測試
習(xí)得性無助的評估通常在電擊程序后24小時(shí)開始，以鞏固記憶。可以調(diào)整測試天數(shù)和持續(xù)時(shí)間。使用大鼠，施加15次電擊，每次60秒，間隔24秒（相位持續(xù)時(shí)間為 200 毫秒，強(qiáng)度為 0.8 毫安）。使用5秒的初始光刺激來宣布隨后的 10 秒*大沖擊（30 秒的試驗(yàn)間隔）。推薦約3秒的試驗(yàn)，試驗(yàn)周期重復(fù) 30 次/天，持續(xù) 3 天。持續(xù)時(shí)間可以根據(jù)動(dòng)物學(xué)習(xí)范式的能力進(jìn)行調(diào)整。
每次測試結(jié)束后，應(yīng)如上所述清潔房間，并將動(dòng)物放回其家籠中。
參考文獻(xiàn)
Batsching S, Wolf R, Heisenberg M (2016) Inescapable Stress Changes Walking Behavior in Flies – Learned Helplessness Revisited. PloS one 11:e0167066.
Chourbaji S, Zacher C, Sanchis-Segura C, Dormann C, Vollmayr B, Gass P (2005) Learned helplessness: validity and reliability of depressive-like states in mice. Brain research Brain research protocols 16:70-78.
Cryan JF, Markou A, Lucki I (2002) Assessing antidepressant activity in rodents: recent developments and future needs. Trends in pharmacological sciences 23:238-245.
動(dòng)物行為分析軟件：
1. VisuTrack軟件
2. SuperMaze軟件
3. FishTrack斑馬魚分析軟件
動(dòng)物行為儀器：
1. 自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射（PPI）、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等
2、動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀
3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析（內(nèi)測中）
4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等
神經(jīng)電生理：
1、光遺傳、無線光遺傳
2、光纖記錄系統(tǒng)（單通道、多通道）
3、電生理信號采集系統(tǒng)（腦電、肌電等）
