視動(dòng)反應(yīng)(optomotor response, OMR)
視動(dòng)反應(yīng)是指斑馬魚(yú)對(duì)移動(dòng)的目標(biāo)有一種追逐 的行為,該反應(yīng)可以用來(lái)檢測(cè)幼魚(yú)和成魚(yú)的視覺(jué)相 關(guān)基因突變。幼年斑馬魚(yú)發(fā)生明顯視動(dòng)反應(yīng)的時(shí)期一般在7dpf 左右。將幼魚(yú)放在一個(gè)狹窄的長(zhǎng)方形水缸中,在魚(yú)缸底部放置一個(gè)顯示器,當(dāng)顯示器中的光 柵朝向某個(gè)方向運(yùn)動(dòng)時(shí),斑馬魚(yú)會(huì)朝著光柵移動(dòng)的 方向運(yùn)動(dòng)。多條魚(yú)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),光柵發(fā)散或聚集, 魚(yú)群會(huì)表現(xiàn)出相應(yīng)的群體反應(yīng)(圖 2)。通過(guò)不斷變換光柵的呈現(xiàn)模式,可以篩選那些對(duì)光柵方向改變反應(yīng)遲鈍的個(gè)體,以達(dá)到篩選視覺(jué)基因缺陷體的目的。因?yàn)榭梢詫⒍鄠€(gè)魚(yú)缸并聯(lián)使用,由此可見(jiàn)這是 一種高通量的篩選方法。
成年斑馬魚(yú)的視動(dòng)反應(yīng)裝置與幼年斑馬魚(yú)的眼 動(dòng)反應(yīng)裝置有點(diǎn)類似(圖3)。斑馬魚(yú)在一個(gè)透光性 好的圓形魚(yú)缸中可以自由游動(dòng),魚(yú)缸中放置一個(gè)小圓柱以阻擋斑馬魚(yú)穿過(guò)中心區(qū)域游動(dòng)。在魚(yú)缸的外圍放置一個(gè)可以轉(zhuǎn)動(dòng)的塑料圓柱,塑料圓柱上貼上一張黑白條紋相間的白紙,在環(huán)形光源的照射下可以產(chǎn)生一組具有時(shí)間頻率和空間頻率的光柵.當(dāng)光柵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)斑馬魚(yú)會(huì)追隨光柵圍繞魚(yú)缸做圓周運(yùn)動(dòng),改變光柵的轉(zhuǎn)動(dòng)方向,斑馬魚(yú)會(huì)對(duì)移動(dòng)方向做出相應(yīng)的調(diào)整。Maaswinkel 等的研究發(fā)現(xiàn),斑馬魚(yú)對(duì) 低空間頻率的光柵刺激會(huì)有一個(gè)明顯的追隨反應(yīng), 而對(duì)于高空間頻率具有頻率選擇作用,對(duì)于時(shí)間頻率的反應(yīng)取決于光柵的空間頻率,固定空間頻率的情況下不同時(shí)間頻率有不同的追隨偏好。
逃避反應(yīng)(escape response)
Li 等1997 年曾使用該行為來(lái)定量地分析斑馬魚(yú)的視覺(jué)敏感性。斑馬魚(yú)放在一個(gè)類似于成年斑 馬魚(yú)視動(dòng)反應(yīng)的裝置中(圖 4),外周的轉(zhuǎn)筒上涂上 一個(gè)某種顏色的條帶或圖案。正常情況下斑馬魚(yú)會(huì)繞擋筒做緩慢的游動(dòng),當(dāng)條帶刺激出現(xiàn)在斑馬魚(yú)的視野中時(shí),斑馬魚(yú)會(huì)迅速地決定是否要游開(kāi)這個(gè)區(qū)域以躲避這個(gè)“捕食者”。這種逃脫行為一般情況下是很明顯的,正常的野生型斑馬魚(yú)在 50 次刺激 當(dāng)中會(huì)有 42 次左右的正向逃脫行為。如果成年斑馬魚(yú)對(duì)某個(gè)顏色習(xí)慣之后可以更換一種顏色刺激.調(diào)節(jié)刺激條帶的光學(xué)強(qiáng)度,可以檢測(cè)斑馬魚(yú)逃避反應(yīng)的激發(fā)閾值。
背光反應(yīng)(dorsal light reflex, DLR)
斑馬魚(yú)野外生存環(huán)境中太陽(yáng)光從其背部投射下來(lái),因此它們都有一個(gè)背向光源的習(xí)性,這個(gè)反應(yīng) 一般需要身體平衡感覺(jué)和視覺(jué)的參與。將斑馬魚(yú)倒 置或傾斜在一個(gè)比較狹小的玻璃管中,光源從魚(yú)的側(cè)面投射過(guò)來(lái)時(shí),斑馬魚(yú)會(huì)轉(zhuǎn)動(dòng)身體以背對(duì)光源。 而當(dāng)光源繞著玻璃管緩慢旋轉(zhuǎn)時(shí),它也會(huì)緩慢地旋轉(zhuǎn)著自己的身體。這個(gè)反應(yīng)在斑馬魚(yú)的視覺(jué)功能檢測(cè)中可以簡(jiǎn)單地檢測(cè)不同波長(zhǎng)的視覺(jué)敏感性。但是Nicolson 等的研究指出,在斑馬魚(yú)的背光反應(yīng)中,發(fā)生明顯旋轉(zhuǎn)障礙的魚(yú)是那些平衡感覺(jué)存在缺 陷的突變體,而視覺(jué)信息在其中的作用不是十分地重要。
文章摘錄來(lái)源
生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,《斑馬魚(yú)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)在神經(jīng)科學(xué)中的應(yīng)用》,鄒蘇琪,殷梧 ,楊昱鵬, 陳林,胡兵,DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00403
動(dòng)物行為分析軟件:
1、VisuTrack軟件
2、SuperMaze軟件
3、FishTrack斑馬魚(yú)分析軟件
動(dòng)物行為儀器:
1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等
2、動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀
3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析(內(nèi)測(cè)中)
4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等
神經(jīng)電生理:
1、光遺傳、無(wú)線光遺傳
2、光纖記錄系統(tǒng)(單通道、多通道)
3、電生理信號(hào)采集系統(tǒng)(腦電、肌電等)