摘要:[目的]研究“醒腦開竅”針法和“調(diào)補氣血”針法對SAMP10行為學異常改變的影響。[方法]采用自然快速老化腦萎縮及癡呆模型小鼠SAMP10,于實驗前后各進行1次穿梭箱實驗,并記錄小鼠遭受電擊次數(shù)、電擊時間及主動反應(yīng)時間。[結(jié)果]實驗前,6月齡P10與R1相比,各行為學指標均有顯著性差異(P<0.01);P10各組之間無顯著性差異(P> 0.05);實驗后,醒腦組、補氣血組各項指標與P10對照組比較,均有明顯改善(P< 0.05,或P< 0.01),與R1比較,均有顯著性差異(P< 0.01),而兩種針法間比較,無顯著差異(P> 0.05)。[結(jié)論]P10較同月齡R1學習記憶能力顯著下降,是理想的腦萎縮及癡呆動物模型。“醒腦開竅”針法和“調(diào)補氣血”針法可部分改善SAMP10的學習記憶能力。

關(guān)鍵詞:快速老化腦萎縮及癡呆模型小鼠(SAMP10);行為學;“醒腦開竅”針法;“調(diào)補氣血”針法

早老性癡呆(AD)是伴隨老化而出現(xiàn)的以進行性癡呆為主的大腦變性**,主要臨床表現(xiàn)為記憶力喪失、智力減退和行為人格退化,至今仍缺乏有效的防治措施。本項研究采用的動物模型是從日本引進的國際公認的自然快速老化模型小鼠SAM

(Senecence Accelerate Mouse),其中SAMP10品系小鼠以學習記憶障礙、腦萎縮為特征;SAMR1隨增齡正常勻速老化,通常作為P品系的正常對照。“醒腦開竅”針法是有名針灸專家石學敏院士創(chuàng)立的**老年期癡呆的臨床驗方,立足于調(diào)神。“調(diào)補氣血”針法是導師韓景獻教授根據(jù)虛是老年期癡呆的病理基礎(chǔ)而確立的針法,從治病求本入手,補其正虛,祛其邪瘀,立足于補虛。

1材料與方法

1.1動物選擇及分組選擇本院繁殖飼養(yǎng)的6月齡SAMP10雄性小白鼠30只,隨機分為醒腦開竅針刺組、調(diào)補氣血針刺組、捉抓空白組,每組10只;另外選擇6月齡SAMP1正常老化雄性小白鼠10只,作為正常老化對照組。

1.2穴位選擇及針刺方法參照中國針灸學會實驗針灸研究會制定的“動物針灸穴位圖譜”,醒腦組選取人中穴、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴,人中穴行雀啄瀉法強刺激10次,內(nèi)關(guān)穴用捻轉(zhuǎn)瀉法20 s;補氣血組選取膻中、中脘、氣海及雙側(cè)血海,均行捻轉(zhuǎn)補法各10 s。上述針法均不留針,其他各組則進行與針刺組相同程度的捉抓,每次持續(xù)40 s。

1.3實驗內(nèi)容穿梭箱實驗:采用上海欣軟信息科技有限公司研制的XR-XC105型小鼠穿梭實驗系統(tǒng)。在安靜環(huán)境中,每天8∶ 00—12∶00進行,室溫(25±1)℃。測試前先將小鼠置于測試箱中自由活動5 min,以消除其探究反射。程序設(shè)置為:蜂鳴5 s,繼之電刺激15 s,間隔15 s,而后重復上述程序,如此循環(huán)20次。電腦將自動記錄非條件反射次數(shù)(即電擊次數(shù))、遭受電擊時間及主動反應(yīng)時間等參數(shù),

以評價小鼠的學習記憶能力。

1.4實驗步驟實驗前,各組小鼠依次做穿梭箱實驗,所得結(jié)果為實驗前數(shù)據(jù)。然后醒腦組及補氣血組開始針刺, SAMP10及R1對照組則進行與針刺組(醒腦組和補氣血組)相同程度的捉抓, 1次/ d,共持續(xù)2周。2周后再進行1次穿梭箱實驗,所得結(jié)果即為實驗后數(shù)據(jù)。全部實驗數(shù)據(jù)均應(yīng)用方差分析和t檢驗進行統(tǒng)計學處理(應(yīng)用SPSS 8.0統(tǒng)計軟件)。

2實驗結(jié)果

本實驗觀察到與正常老化的SAMP1及SAMP10針刺組相比,SAMP10對照組表現(xiàn)為明顯的行動遲緩,活動量減少,對周圍環(huán)境的改變和刺激反應(yīng)遲鈍,皮毛無光澤,脫毛,部分小鼠出現(xiàn)皮膚潰瘍及脊柱彎曲等。各組小鼠穿梭箱實驗電擊次數(shù)、電擊時間及主動反應(yīng)時間明顯不同。數(shù)據(jù)結(jié)果詳見表1。

以上結(jié)果提示: 1)實驗前, 6月齡SAMP10與同月齡正常老化的SAMP1相比,各項指標均有顯著性差異(P< 0.01),說明P10學習記憶能力低于正常對照組R1;而6月齡P10各組之間各項行為學指標無明顯差異(P> 0.05),說明處于同一水平。2)實驗后,醒腦組、補氣血組各行為學指標與同品系對照組比較,均有明顯改善(P<0.05,或P<0.01),但未達到正常老化的R1水平,說明兩種針法可部分改善SAMP10學習記憶能力下降的狀況,而兩種針法間比較,無顯著差異(P> 0.05)。3)實驗前后,

各組自身進行對照比較,均未出現(xiàn)顯著性差異(P10對照組電擊時間、電擊次數(shù)有增高趨勢,主動反應(yīng)時間有減少趨勢。針刺組則與之相反)。

3討論

行為學實驗是專門研究動物行為變化的常用實驗方法,通常用于觀察和研究神經(jīng)、精神及心理等方面的異常變化或表現(xiàn),在基礎(chǔ)研究中具有十分重要的意義,也是判斷癡呆的基本方法之一。穿梭箱實驗是定量測試動物行為學改變的重要手段。SAMP10在全身迅速老化的同時,腦老化所致的腦機能衰退表現(xiàn)尤為明顯,表現(xiàn)為學習記憶困難,低恐怖不安狀態(tài)等智能障礙。本課題觀察了“醒腦開竅”針法和“調(diào)補氣血”針法對SAMP10行為學異常改變的影響。實驗結(jié)果表明,實驗后,6月齡SAMP10針刺組的電擊次數(shù)、電擊時間均明顯少于同品系的P10對照組(P< 0.05,P< 0.01),而主動反應(yīng)時間則明顯長于同品系P10對照組(P< 0.05);醒腦組與補氣血組之間,則無顯著性差異。說明上述兩種針法均能不同程度的改善

SAMP10小鼠的學習、記憶能力。從P10針刺組實驗前后自身對照來看,各項指標未出現(xiàn)明顯變化,且P10針刺組與R1相比,實驗后各項指標仍存在顯著性差異,說明針刺只能部分改善SAMP10小鼠學習、記憶能力。