條件性恐懼實驗測試方案
模型的制備：將大鼠放在動物飼養(yǎng)室內(nèi)適應一周。飼養(yǎng)室內(nèi)溫度為24±0.5℃，濕度為60%，光：暗周期為12h：12h（光照時間為8：00-20：00），隨機分籠單獨飼養(yǎng)，自由進食、飲水。
A．條件性恐懼的建立：將大鼠分別放入斯金納箱（箱子底部為銅條柵欄，可通電）內(nèi),適應2分鐘后再給予單一頻率聲音信號(4.5KHZ,60dB,30S，該聲音由美國Adobe公司的Adobe Audition2.0軟件制作)適應4次（兩次聲音間隔1-4分鐘）,然后再給予6次以聲音信號為提示的不可逃避足底電擊(1mA,5s)，聲音與電擊同時結(jié)束，兩次聲音間隔為1-4分鐘，共28分鐘。動物在被電擊時發(fā)生驚叫、驚跳、逃避等,聽到聲音提示時出現(xiàn)慌張、逃避或者僵立行為（除呼吸外無其他運動行為），這樣建成恐懼動物模型（以下簡稱建模）。實驗結(jié)束后讓動物在斯金納箱內(nèi)繼續(xù)停留2分鐘后放回飼養(yǎng)籠飼養(yǎng)。每次實驗結(jié)束后用90%酒精擦拭箱底，用濕布擦拭箱壁，以避免殘留氣味對后續(xù)實驗大鼠的影響。
B．恐懼消退訓練：24h后將已經(jīng)建立條件性恐懼的動物再次放入斯金納箱內(nèi)，僅給予聲音信號16次，兩次聲音間隔為1-2分鐘，共24分鐘。恐懼對照組在對應的時間點放進斯金納箱內(nèi)24分鐘，不進行消退訓練（不給聲音刺激）。
C．條件性恐懼消退保持測試：恐懼對照組和恐懼消退組（注：此時大鼠分為兩組：恐懼消退組和對照組）分別在恐懼消退訓練后的第1、3、7天將大鼠放在訓練箱內(nèi)，給予5次聲音信號，時間間隔為0.5s，記錄3分鐘內(nèi)的不僵立時間，計算3分鐘內(nèi)不僵立時間百分比，作為消退保持成績。百分比越高，表明消退保持成績越好。
需要記錄的實驗測試指標：
1）Freezing相關(guān)：實驗時間、freezing總次數(shù)、每次freezing時間點、每次freezing持續(xù)時間、freezing總時間、freezing時間占總時間的百分比。
2）活動度相關(guān)：總實驗時間、總距離(cm)、總平均速度(cm/s)、每個階段的時間、距離及平均速度。
附：XR-XC404型恐懼記憶實驗系統(tǒng)
場景恐懼實驗控制器支持程控輸出，即通過軟件控制刺激信號的輸出，同時，還支持手動輸出，方便用戶開展其他相關(guān)實驗
場景恐懼實驗刺激器同時支持正弦波恒流電刺激與雙極性直流脈沖恒流電刺激的輸出，這2種刺激方式在很多國外文獻上有明確規(guī)定
電刺激均為9電極擾頻（交替）輸出，可有效避免實驗動物“刺激盲區(qū)”與電柵欄短路
標配隔音箱，隔音箱采用高分子密度板制作，帶有通風裝置
恐懼實驗箱尺寸可根據(jù)具體實驗**定制
恐懼實驗箱底部配有黑白2種可拖拉屎尿托盤，設計人性化
恐懼實驗裝置可以選配光刺激模塊，增加實驗的條件刺激方式
