穿梭箱實驗對不同實驗條件的影響機制
本研究在考察實驗條件對于KM鼠學習記憶影響的基礎上,又考察了大鼠不同鼠種對學習記憶形成的差異。結果表明:對于同樣的實驗條件設置,兩組的學習成績相比差異具有顯著性,Wistar大鼠較SD大鼠更易形成條件反射;考慮到鼠類晝伏夜行的生活習性,本研究又考察了訓練時辰對于Wistar大鼠學習記憶的影響,結果表明:白天訓練組與夜晚訓練組的學習成績比較,差異沒有統計學意義,訓練時辰對于Wistar大鼠的記憶獲得沒有影響。
對于記憶保持,本研究只考察了KM小鼠及Wistar大鼠訓練達標(ROA>0.75)后間隔不同天數的記憶保持情況。在考察的時間間隔內,其學習與記憶成績相比差異沒有統計學意義,說明其記憶在獲得后,相對穩定且能夠保持較長一段時間。但其記憶到底能保持多久,還有待于今后進一步研究。SD大鼠在已知的實驗條件下及規定的訓練時間內沒有達標,所以本研究未考察其記憶保持情況。
總之,大小鼠穿梭箱的訓練成績受諸多因素的影響。相同的實驗條件設置,不同的鼠種、品系或者相同的品系,不同的實驗條件設置均對大小鼠的學習記憶的形成產生較大影響。因此,實驗者應因鼠而異,制訂適宜的訓練方案,使其盡快達到訓練標準。實驗儀器如圖所示:
XR-XC105型
實驗步驟
實驗分為記憶獲得和記憶保持兩個階段。實驗開始時首先設定實驗參數,包括**期(非條件刺激與條件刺激之間的間隔時間)、條件刺激(高頻率的穩定聲音刺激或者閃光燈強光刺激)時間、非條件刺激(電擊)時間及強度、穿梭次數等。在記憶獲得階段首先把實驗鼠放入左側室,接近并面向端壁,適應5 min后開始訓練。穿梭實驗視頻分析系統按照預先設定好的程序,先給一個可以察覺的條件刺激,持續一定時間后,如果實驗鼠仍停留在同側,則再給一個非條件刺激。動物受到電擊后將從圓洞逃至對側一定時間后,對側再給予條件和非條件刺激,如此反復。每只鼠連續訓練10 d,每天穿梭幾十次。一次穿梭訓練結束后,間隔一定
時間開始下一次訓練。經過反復訓練后,只給條件刺激,動物即逃到對側**區以逃避電擊,此即形成了條件反射或稱主動回避反應。全部訓練結束后,計算機顯示出每次穿梭的軌跡,記錄大(小)鼠的主動回避反應(active avoidance response,AAR,即動物在條件刺激后,非條件刺激到來之前就產生的穿梭)次數;被動回避反應(passive avoidance response,PAR,即實驗鼠在非條件刺激后才產生的穿梭)次數;逃避失敗(escape failure,EF,指實驗鼠在條件刺
激和非條件刺激的過程中仍然停留在同側箱中)次數。以AAR作為其學習記憶成績的主要評價指標,并計算主動回避反應率(rate of AAR,ROA,即主動回避反應次數AAR占穿梭總數N的百分比),統計ROA>0.75(達標)的動物的百分比.
記憶獲得實驗
不同條件刺激和條件刺激時長對KM小鼠記憶獲得的影響 KM 鼠32只,隨機分為3組。SG5s組:11只,給予聲光刺激5 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5 S;G5s組:10只,給予光刺激5 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5 S;G10s組:11只,給予光刺激10 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5s。每組連續訓練10 d,每天1次,每次穿梭3O次。訓練成績用AAR表示。統計訓練10 d中動物的達標(ROA>0.75)百分率,比較訓練d 7兩組間動物AAR的差異。
鼠種對于大鼠記憶獲得的影響 實驗分2組,Wistar組:Wistar大鼠10只,給予聲光刺激10 S,**期30 S,交流電(0.7 mA)擊lOs;SD組:sD大鼠10只,刺激條件同Wistar組。每組連續訓練10d,每天1次,每次穿梭20次。
記憶保持實驗
KM小鼠記憶保持情況考察 KM小鼠70只,按照“1.4.1”中G10s組的實驗條件連續訓練14d,每天1次,每次穿梭30次。選取ROA>0.75的小鼠36只,用同樣的訓練方法再連續訓練3 d。取其AAR的均值作為小鼠記憶獲得成績(0 day)。然后隨機分為6組,每組6只,分別用于考察間隔2、4、6、11、14、21 d后記憶保持情況,以AAR作為記憶保持成績評估指標。
訓練時辰及鼠種對于大鼠記憶獲得的影響