一、條件性恐懼實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) 1.動(dòng)物對電擊的反應(yīng)部分地取決于非條件刺激的電擊強(qiáng)度和痛#。當(dāng)動(dòng)物(尤其是基因改變的動(dòng)物,如轉(zhuǎn)基因或基因敲除小鼠)不能學(xué)會(huì)關(guān)聯(lián)條件反射時(shí),可能是電擊強(qiáng)度不夠或痛#偏高所致。對條件反應(yīng)程度與電擊強(qiáng)度進(jìn)行比較分析,可排除對電擊強(qiáng)度因素的疑慮;對刺激電流強(qiáng)度(0.1~0.7mA)與反應(yīng)作一“量-效曲線”,可評價(jià)動(dòng)物的痛#或?qū)﹄姄舻拿舾行浴4送猓駯诺匕迦粽从袆?dòng)物的排泄物也可改變電刺激強(qiáng)度。因此,應(yīng)保持格柵地板的清潔與干燥。
2.由于老年動(dòng)物聽力減弱甚至喪失,對聽覺暗示可能反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)。此外,有些品系的小鼠,即使在成年早期,對高頻音刺激的反應(yīng)尤其減弱。因此,用這一模型測定老年動(dòng)物或某些品系的小鼠時(shí)應(yīng)特別謹(jǐn)慎,并避免用高頻音刺激。
3.要使動(dòng)物在關(guān)聯(lián)測試中表現(xiàn)凝滯行為,必須讓其在操作箱內(nèi)有適當(dāng)?shù)臅r(shí)間。應(yīng)避免將動(dòng)物放入箱內(nèi)便立即給予電刺激,因?yàn)檫@樣動(dòng)物沒有時(shí)間在電擊與箱內(nèi)環(huán)境(關(guān)聯(lián))之間形成聯(lián)系。
4.觀察者必須快速、準(zhǔn)確地判定動(dòng)物是否表現(xiàn)凝滯行為,而不應(yīng)在整個(gè)10s觀察期間死盯著動(dòng)物,以免動(dòng)物在這10s間隙活動(dòng)而導(dǎo)致計(jì)分不準(zhǔn)。不同觀察者應(yīng)用同一種方法計(jì)分,兩名觀察者計(jì)分之間的相關(guān)系數(shù)應(yīng)在0.98以上。同樣地,當(dāng)采用自動(dòng)計(jì)分系統(tǒng)進(jìn)行計(jì)分時(shí),應(yīng)對系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié),使之與人工方法計(jì)分相比,兩者的相關(guān)系數(shù)在0.98~1之間。
5.在本實(shí)驗(yàn)中,先測試關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí),再測試暗示條件反應(yīng)。在關(guān)聯(lián)測試中沒有聽覺暗示刺激,因此,動(dòng)物在暗示條件測試時(shí)對聽覺刺激的反應(yīng)有可能發(fā)生消退(extinction)。理論上,這種聽覺暗示反應(yīng)可能減弱。為消除這種實(shí)驗(yàn)偏差,將其中一半動(dòng)物先測試聽覺暗示反應(yīng),一小時(shí)后再檢查關(guān)聯(lián)條件反應(yīng)。
6.實(shí)驗(yàn)分兩天進(jìn)行。訓(xùn)練和測試應(yīng)在每天的同一時(shí)間進(jìn)行。測試(凝滯計(jì)分)所花的時(shí)間比訓(xùn)練要長的多,因此,同一批訓(xùn)練的動(dòng)物不宜過多。
7.暗示和關(guān)聯(lián)兩種條件恐懼可表現(xiàn)出發(fā)育差異和基因差異。例如,年齡在18天的大鼠有聽覺條件恐懼,但極少有關(guān)聯(lián)條件恐懼;而到23天時(shí),關(guān)聯(lián)和聽覺暗示條件恐懼都有。有些品系的小鼠(如DBA/2小鼠)只有很弱的關(guān)聯(lián)條件恐懼,但聽覺條件恐懼卻很好。
8.對有些基因型動(dòng)物,如果預(yù)先讓其短暫適應(yīng)關(guān)聯(lián)條件,關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí)會(huì)得到改善。一般認(rèn)為這與海馬功能增強(qiáng)有關(guān)。這種適應(yīng)通常在訓(xùn)練前**進(jìn)行,而且時(shí)間很短(30~60s)。
9.暗示條件恐懼由側(cè)杏仁核調(diào)節(jié),而關(guān)聯(lián)條件恐懼由杏仁核和海馬共同介導(dǎo)。毀損這些腦區(qū)可削弱或阻斷暗示與關(guān)聯(lián)恐懼條件反射。