穿梭、避暗(明暗箱)實驗方法回避實驗是利用動物的好暗避光(明暗穿梭)、對厭惡刺激(如足電擊)的恐懼和記憶而建立起來的。所以對實驗者(而不是對動物)而言,回避實驗在技術上與暗示關聯條件恐懼相類似。所用的刺激為溫和的足電擊,發生的反應是動物逃避曾經受到電擊刺激的地方。根據動物的逃避方式分為主動回避和被動回避(active and passive avoidance)。前者要求動物主動從有厭惡刺激的箱中逃離;后者則要求動物遏制自己而不進入有厭惡刺激的箱。根據所用儀器設備的不同又可分為穿梭回避、跳臺回避、Y-形迷宮回避。這里主要介紹前兩種回避。
一、 實驗設備
(一)穿梭回避實驗設備 包括穿梭箱、刺激控制器和計算機。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司提供的穿梭箱。它包括左右兩個同等大小(20.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主動回避可不用暗箱)。兩隔室之間由一個拱形門(8.9cm*11.4cm)相聯,門可由實驗者根據實驗需要關上或打開。隔室地板為不銹鋼柵欄(直徑:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。暗箱一側的柵欄地板與刺激器相聯,并可給予電擊;明箱一側則不與刺激器相聯,故沒有電流通過。
(二) 跳臺回避實驗裝置 將上述穿梭箱的中門移去,代之以一個平臺(可隨Med Associates穿梭箱配套),即可改裝成跳臺回避實驗裝置。這里介紹美國另外一個儀器公司Coulboum儀器公司的跳臺回避裝置。它包括一個15cm*25cm*10cm的透明有機玻璃跳臺箱、一個隔音外箱(48cm*62cm*24cm)和一臺脈沖電刺激器組成。跳臺箱底部的柵欄與刺激器相聯,中央固定一個3.5cm*3.5cm*2.5cm的木制平臺。實驗時,將跳臺箱放入隔音箱內,以防外界干擾。
二、實驗方法
(一)小鼠穿梭被動回避實驗(mouse step-through passive avoidance)
1.單次電擊刺激訓練
(1)將小鼠放入明箱,10s后,將明暗箱之間的門打開。多數品系的小鼠有很強的探究行為,喜暗惡光。因此,小鼠會很快進入暗箱。
(2)小鼠(四肢)完全進入暗箱后,立即將中門關上,并給予一次電擊。電擊強度為能引起小鼠退縮和發聲的*小電流。根據小鼠品系不同,電流范圍為0.2~0.8mA(100V,50~60Hz AC),持續1~2s。
(3)讓小鼠在暗箱內停留10s(以使讓動物形成箱與電擊之間的關聯),將小鼠放回籠內。清潔操作箱。進行下一只動物的訓練。
2.記憶保持測試(retention test) 電刺激訓練24h后,將小鼠放回明箱,中門打開,但不給電擊。