鉛是一種神經發育毒物，它對神經細胞的正常發育以及神經遞質的正常分泌產生影響和損害[1]，故而，進一步影響學習和記憶能力。海爾福口服液是我院研制生產的保健口服液，已初步證明了其有明顯升高鉛中毒小鼠Hb含量、降低ALT活性等作用[2]。為了進一步研究海爾福口服液對鉛中毒所致小鼠記憶障礙的影響作用并分析其機制，我們曾用復雜迷宮趨食法測定小鼠記憶障礙的改善情況，結果較理想，為進一步驗證其療效，本文用Y型水迷宮測定小鼠的逃避潛伏期和平均逃避達標率。有報道鉛中毒者血鉛與血鋅水平呈負相關，認為糾正缺鋅狀態是減少腸道對鉛吸收的重要措施[3]，因此，我們嘗試用鋅**鉛中毒小鼠，觀察其改善記憶障礙的作用，并分析鋅與海爾福口服液在**鉛染毒所致小鼠記憶障礙中的作用關系。
1 資料與方法
1.1 實驗動物 昆明種健康雄性小鼠60只，鼠齡35天，平均體重20g。由右江民族醫學院動物室（合格）提供。
1.2試劑 醋酸鉛為國產分析純；海爾福口服液（由銀花、茯苓、甘草等中藥，經水提取、乙醇沉淀等流程制成）由本院海爾福研制中心提供；葡萄糖酸鋅口服液由哈藥集團三精制藥有限公司生產（批號：05040331）。
1.3 Y型水迷宮測定方法 Y型水迷宮是測定小鼠辨別性記憶的*簡單*常用的方法，該裝置分長臂端和兩分枝短臂端。長臂端長40cm , 寬15 cm，短臂端長30cm, 寬15 cm。長、短臂高均為20 cm。左側短臂裝有平臺，供小鼠棲身，右側短臂用木板蓋上，作為暗道，水深10cm，水溫（28±0.5）℃。。實驗時將小鼠尾對叉路從長臂端輕輕放入水中，以其在10s內直接抵達平臺為正確反應。小鼠抵達平臺休息15s再重復訓練，每天訓練10次，連續5天，以每組平均正確反應率和抵達平臺所需時間(逃避潛伏期)作為評價記憶的指標[4]，逃避潛伏期若超過10s則以10記錄。
1.4 動物染毒和**方法 60小鼠隨機分成5組：鋅**組、鋅加海爾福**組、海爾福**組、單純染鉛組、陰性對照組。除陰性對照組外，其余4組均用2g/L的醋酸鉛水溶液，按每克體重0.007ml劑量作腹腔注射染毒，每天1次，連續35天；陰性對照組用等體積的生理鹽水腹腔注射。染毒14天后，鋅**組用葡萄糖酸鋅水溶液灌胃，劑量按每只鼠0.02mg，每天1次；海爾福**組用海爾福口服液，劑量為每鼠0.1ml，用蒸餾水稀釋1倍后灌胃，鋅加海爾福**組用葡萄糖酸鋅加海爾福口服液混合后灌胃，劑量與鋅**組和海爾福**組相同；單純染鉛組和陰性對照組用等體積的蒸餾水灌胃，每天1次，直至實驗結束。
1.5 統計學分析 用SPSS 10.0 統計軟件包，進行方差分析。
2. 結果
2.1逃避潛伏期比較 單純染鉛組的逃避潛伏期長，與其他4組比較差異有顯著性（p<0.01和p<0.05）。海爾福**組和鋅**組的逃避潛伏期比鋅加海爾福**組為短，差異有顯著性（p<0.05）。從測試第1天到第5天，各組的逃避潛伏期以第1天*長，然后逐漸縮短，差異有顯著性（p<0.01）。見表1。
表1 各組小鼠用Y型水迷宮所測的逃避潛伏期比較（X±S，S）
第1天 第2天 第3天 第4天 第天 合計 |
鋅**組 4.82±0.72 3.92±0.51 3.25±0.48 3.15±0.80 2.78±0.80 3.66±0.98Δ* 鋅加海爾福**組 5.30 ±1.32 4.28±1.38 3.86±1.08 3.56±1.31 3.24±0.62 4.10±1.32# 海爾福**組 5.，Δ* 合計 5.45 ±1.29 4.18±0.89▽ 3.43±1.00▽ 3.27±0.94▽3.28±1.02▽ |
注：與單純染鉛組比較，Δp<0.01，#p<0.05；與鋅加海爾福**組比較，*p<0.05；與第1天比較，▽p<0.01。
2.2 平均逃避達標率比較 鋅加海爾福**組和單純染鉛組的平均逃避達標率較其他3組低，鋅**組與單純染鉛組比較，差異有顯著性（p<0.05）。從第1天到第5天，各組平均逃避達標率總體上逐漸提高。見表2。
表 2 各組小鼠用Y型水迷宮所測的平均逃避達標率比較（X±s）
第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 合計 |
鋅**組 83.85±0.07 90.63±0.06 95.01±0.05 98.10±0.04 97.15±0.04 94.20±0.06# 鋅加海爾福**組 77.55±0.15 90.55±0.06 90.25±0.10 96.12±0.05 95.15±0.12 89.05±0.11 海爾福**組 73.23±0.19 88.35±0.08 96.15±0.05 100.00±0.00 97.38±0.05 91.27±0.13 單純染鉛組 77.35±0.15 88.25±0.13 90.44±0.06 92.23±0.08 96.36±0.05 88.15±0.11 陰性對照組 75.16±0.19 91.28±0.07 96.24±0.08 98.74±0.04 98.80±0.04 92.70±0.15 合計 79.46± 0.17 90.46±0.06 ▽ 93.33±0.08▽ 97.25±0.05▽ 96.36±0.06▽ |
注：與單純染鉛組比較，#p<0.05；與第1天比較，▽p<0.01。
3. 討論
本實驗用Y型水迷宮測定小鼠的記憶能力，鋅**組和海爾福**組的逃避潛伏期比單純染鉛組短，平均逃避達標率提高，說明海爾福口服液和葡萄糖酸鋅均對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用，效果較好。鋅具有很強的誘導金屬硫蛋白（MT）作用，MT與鉛結合可使鉛失去毒性[5]；鋅還能拮抗鉛對ALAD的抑制作用。本實驗結果與此報道一致。海爾福口服液是由銀花、茯苓、甘草等中藥提煉而成，其中的茯苓等有較強抗氧化作用。而鉛致腦組織脂質過氧化是引起神經行為改變的生物學基礎之一[6]，故較強的抗氧化成分可能是海爾福口服液**鉛中毒所致小鼠的記憶障礙的原因之一，其機制有待進一步研究。
各組平均逃避達標率比較，差異不大，僅鋅**組同單純染鉛組比較，差異有顯著性。原因可能為實驗時間較短，鉛中毒小鼠的辨別性記憶損害尚不明顯，表現為平均逃避達標率的雖有提高，但各組間差異不顯著。
在實驗結果中我們發現，鋅加海爾福**組對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用，但同鋅**組和海爾福**組的**效果比較，逃避潛伏期延長，平均逃避達標率降低，提示海爾福口服液和葡萄糖酸鋅在**鉛中毒所致小鼠的記憶障礙上可能有一定拮抗作用，其機制不詳，有待進一步研究。
